产品货号:
JN5052
中文名称:
2×Taq MasterMix(含染料)
英文名称:
2×Taq PCR Master Mix(Quick Load)
产品规格:
5mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq Master Mix专为常规PCR扩增反应优化,扩增长度可达8kb,能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。本制品为快速上样型,经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
- 常规PCR鉴定;
- 小片段目标基因克隆;
- 平端PCR产物加A。
- 高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增≤4kb片段。
- 灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
- 稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。
- 快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
- 便利:PCR反应后可直接电泳(含染料形式)。
组分 | 5mL | 25mL |
2×Taq MasterMix(含染料) | 5×1mL | 25×1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
- 需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
- 菌液PCR时预变性时间≥5min,更有利于破壁。
- 应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增。
- 根据引物Tm值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特性扩增;过高可能扩增不到。
- 使用本试剂扩增得到的PCR产物3'端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
- 当扩增较长片段时,推荐使用2×Taq Plus MasterMix(货号:JN0032)。
使用普通(A组)及含染料(B组)的2×Taq MasterMix配制的50μL扩增体系,以5ng λDNA为模板,对500bp~6.0kb片段的扩增结果。
泳道1:500bp;泳道2:1kb;
泳道3:2kb;泳道4:4kb;
泳道5:6kb;
泳道M:1kb DNA Ladder Plus II。
- 常用反应体系
注:Mg2+终浓度为2mM。成分 用量 2×Taq MasterMix 25μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 模板 1~50ng(质粒)或10ng~1μg(基因组) ddH2O 至50μL - 推荐PCR反应程序
- 当扩增片段<3K:
循环数 温度 时间 1 94℃ 90s 30 94℃ 20s 50~60℃ 20s 72℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温 - 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
循环数 温度 时间 1 94℃ 5min 30 94℃ 5s 68℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温
- 当扩增片段<3K:
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